کلون و بیان ژن flic به عنوان کاندیدای واکسن علیه بیماری تیفوئید

نویسندگان

زهرا عادلی

zahra adeli department of microbiology, damghan branch, islamic azad university, damghan, iranدانشگاه آزاد دامغانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (islamic azad university science and research branch) نجمه فراهانی

najmeh farahani department of genetics and molecular biology, isfahan university of medical sciences, isfahan, iranدانشگاه علوم پزشکی اصفهانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اصفهان (isfahan university of medical sciences) سید احمد موسوی

seyed ahmad mosavi department of health and community medicine, faculty of medicine, dezful university of medical sciences, dezful, iranدانشگاه علوم پزشکی دزفولسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی دزفول (dezful university of medical sciences) سید یعقوب صهری

seyed yaghoob sehri faculty of medicine, najmiyeh hospital, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranدانشگاه علوم پزشکی بقیه اللهسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (baqiyatallah university of medical sciences) حکمت الله مرادی موگرمون

چکیده

پیش زمینه و هدف: سالمونلا انتریکا یک پاتوژن زئونوز است که می تواند باعث تب تیفوئید در انسان و حیوان شود. این باکتری یکی از علل مهم عفونت های ناشی از مواد غذایی در انسان در سراسر جهان است. از مطالعات اخیر تخمین زده می شود که سالانه حدود 22 میلیون مورد ابتلا به این بیماری گزارش می شود که از این تعداد 200 هزار نفر را به کام مرگ می کشاند. فلاژلینی که توسط flic کد می شود نقش مهمی در بیماری زایی دارد و می تواند به عنوان آنتی ژنی قوی در واکسن مورداستفاده قرار گیرد. این مطالعه باهدف تولید پروتئین نوترکیب flic به عنوان یکی از کاندیداهای واکسن علیه بیماری سالمونلوز انجام شد. مواد و روش کار: توالی پروتئین flic از پایگاه داده ncbi اخذ شد. برای بیان حداکثری، ژن موردنظر با توجه به ترجیح کدونی e. coli ساخته شد. ژن سنتتیک از وکتور puc57 به وکتور بیانی pet28a+ زیرهمسانه سازی شد و سپس به میزبان e. coli bl21de3 تراریخت شد. پروتئین نوترکیب با القاء iptg بیان شد. برای بیان حداکثری، سه پارامتر شامل غلظت iptg، زمان و دما بهینه سازی گردید. پروتئین نوترکیب حاوی his-tag به وسیله ستون کروماتوگرافی  تعویض یون ni-nta agarose خالص سازی شد. پروتئین خالص شده با آزمایش وسترن بلات تائید شد. یافته ها: وکتور نوترکیب با واکنش pcr و نیز آنالیز آنزیم های تحدیدی تائید شد. آزمایش sds-page وجود یک پروتئین 51 کیلو دالتونی با خلوص مناسب را نشان داد. همچنین آزمایش وسترن بلات با آنتی بادی his-tag پروتئین مدنظر را تائید نمود. بحث و نتیجه گیری: امروزه استفاده از واکسن های نوترکیب بسیار موردتوجه قرار گرفته است. با توجه به اینکه در مطالعه حاضر ژن یکی از مهم ترین فاکتورهای بیماری زایی باکتری سالمونلا همسانه سازی و پروتئین مربوط به آن تولید و تخلیص شده است. این پروتئین می تواند به عنوان یکی از کاندیداهای مناسب در واکسن های نوترکیب علیه تیفوئید مورداستفاده قرار گیرد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

کلون و بیان ژن fliC به‌عنوان کاندیدای واکسن علیه بیماری تیفوئید

Background & Aims: Salmonella enterica is a zoonotic pathogen causing typhoid fever in humans and animals. It is an important cause of food borne infections in humans throughout the world. A recent study estimated approximately 22 million cases of typhoid each year with at least 200,000 deaths. FliC encoding flagellin plays a role in pathogenesis and is an important antigen in vaccination....

متن کامل

کلون‌سازی و بررسی بیان ژن ureG به عنوان کاندیدای واکسن ژنی علیه هلیکوباکتر‌‌پیلوری

مقدمه: هلیکوباکتر پیلوری، نوعی باکتری گرم منفی است که جمعیت زیادی از جوامع انسانی را در سراسر جهان دچار کرده است. اوره‌آز هلیکوباکتر‌پیلوری برای بقای آن در معده‌ی انسان ضروری است و ژن ureG یکی از مهم‌ترین عوامل مهم بیماریزایی آن است. هدف: کلون‌سازی ژن ureG برای ایجاد واکسن ژنی علیه هلیکوباکتر‌پیلوری مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، نخست از هلیکوباکتر‌پیلوری DNA استخراج شد. تکثیر ژن ureG با ...

متن کامل

بیان نوترکیب انتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس تیپ B به عنوان کاندیدای واکسن

زمینه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس(Staphylococcus aureus)، کوکسی گرم مثبتی است که می­تواند بیماری های مختلفی چون مسمومیت­های غذایی، شوک های مخاطره آمیز و ... را به وجود آورد. از مهم­ترین سموم تولید شده توسط این باکتری، انتروتوکسین نوع B یکی از معمولترین و مهم­ترین توکسین­های یافت شده و یک سوپر آنتی ژن می باشد. هدف از انجام این تحقیق همسان سازی و بیان این پروتئی...

متن کامل

بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم

چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترک...

متن کامل

کلون سازی و بررسی بیان ژن ureB هلیکوباکتر پیلوری با استفاده از وکتور بیانی pcDNA3.1(+)

مقدمه: هلیکوباکتر پیلوری عامل بیماری هایی مانند گاستریت، زخم های گوارشی و سرطان غدد لنفاوی و دستگاه گوارشی است. هنوز واکسن موثری علیه هلیکوباکتر پیلوری تولید نشده است. آنزیم اوره آز یکی از عوامل مهم تحریک سیستم ایمنی میزبان است. بنابراین هدف این تحقیق کلون سازی و بررسی بیان ژن ureB به عنوان کاندیدای واکسن ژنی علیه هلیکوباکتر پیلوری می باشد. روش کار: در این بررسی تجربی، ژن کد کننده ی ureB از ژنو...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله پزشکی ارومیه

جلد ۲۷، شماره ۸، صفحات ۶۸۳-۶۹۱

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023